实验动物麻醉药物使用指南(2025版)
一、引言
实验动物麻醉需严格遵循《实验动物福利伦理审查指南》(GB/T 35892-2018)及 IACUC(动物实验管理委员会)审批要求,本指南聚焦大小鼠等常见实验动物的麻醉方案,明确禁用药物、推荐剂量及操作要点,助力科研合规开展。
二、麻醉剂分类与核心信息
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1. 镇静与麻醉前给药 | 2. 注射用全身麻醉剂 | 3. 吸入性全身麻醉剂 | 4. 局部麻醉剂 | 5. 术后镇痛剂
1. 镇静与麻醉前给药
用于缓解动物焦虑、减少主麻醉剂剂量,重点关注大小鼠适用方案。
药物类别
常用药物
大小鼠适用剂量与途径
核心作用
重点注意事项
抗胆碱药
阿托品(Atropine)
小鼠:0.02-0.05mg/kg(SC)
大鼠:0.04-0.1mg/kg(SC)
抑制唾液 / 呼吸道分泌,防心动过缓
部分大鼠、兔品系易分解此药;心脏手术禁用
苯二氮䓬类
地西泮(Diazepam)
小鼠:5mg/kg(IP)
大鼠:0.5-15mg/kg(IP)
镇静、抗惊厥,增强麻醉效果
静脉注射过快致呼吸停止;可与氯胺酮联用但不可混合注射
α-2 受体激动剂
美托嘧啶(Medetomidine)
大鼠:0.25-0.5mg/kg(IP,常联合氯胺酮);小鼠:效果弱,不推荐单独使用
强效镇静 + 镇痛,减少主麻醉剂用量
需备拮抗剂阿替美唑(1mg/kg SC);对小鼠效果差
α-2 受体激动剂
赛拉嗪(Xylazine)
小鼠:5-21mg/kg(IP/IM,联合氯胺酮);大鼠:5-10mg/kg(IP/IM,联合氯胺酮)
镇静 + 肌肉松弛
致高血糖,需监测大小鼠血糖;猪不敏感
2. 注射用全身麻醉剂推荐
药物名称
适用动物
给药途径与大小鼠剂量
麻醉时长
核心优势
重点注意事项
舒泰-50(Zoletil 50)
猫、犬、猴、大鼠、小鼠(高剂量)
大鼠:IP(舒泰75mg/kg + 赛拉嗪 5mg/kg,或单独舒泰 40mg/kg);
小鼠:IP(舒泰 50mg/kg + 赛拉嗪 5mg/kg,低剂量 < 50mg/kg 易兴奋)
30min 左右
【注射麻醉首选推荐】非管制,麻醉平稳;联合用药可增强药效
对兔、豚鼠麻醉效果不佳;高剂量肌内注射致兔尿素氮、肌酐升高;替来他明(NMDA 受体抑制剂)为麻醉主导成分
氯胺酮(Ketamine)
非人灵长类、猫、猪、大鼠、小鼠
小鼠:单用50-100 mg/kg(IP)40-60 mg/kg(IMIP(联合赛拉嗪 40-85mg/kg K+5-21mg/kg X 或 90-120mg/kg K+5-10mg/kg X);
大鼠:IM(单独 22-50mg/kg,联合赛拉嗪 50-100mg/kg K+10mg/kg X),IP(联合赛拉嗪 50-100mg/kg K+10mg/kg X)
20-40min
镇痛强,安全范围广
需联合阿托品(防大小鼠流涎);单用时肌肉僵直,需配美托嘧啶 / 赛拉嗪;无合法获批渠道时严禁使用
戊巴比妥钠(Pentobarbital Sodium)
犬、兔、大鼠、小鼠
小鼠:IP(50-90mg/kg,新生乳鼠 5mg/kg);大鼠:IP(30-60mg/kg)、IV(30-40mg/kg)
40-60min
易储存,起效快
无医用级注射液,市售粉剂多为非医用级(浓度不精确、易污染);镇痛弱,大小鼠存活性手术及开腹手术绝对禁用;仅限作为安乐死药物(小鼠 / 大鼠 100-200mg/kg IP)
3. 吸入性全身麻醉剂推荐
药物名称
适用动物
给药途径与剂量
麻醉深度控制
核心优势
重点注意事项
异氟烷(Isoflurane)
全物种(含大小鼠妊娠 / 新生个体)
小鼠/大鼠:IH(诱导 4-5%,维持 1-3%)
易调控
代谢率仅 0.2%,对大小鼠肝肾功能损伤小
需专用麻醉机(挥发罐);操作需在通风橱或抽气柜内进行
七氟烷(Sevoflurane)
全物种
小鼠/大鼠:IH(诱导 5-8%,维持 2.5-4%)
易调控
气味温和,大小鼠诱导 / 苏醒更快
需通风橱操作;避免浓度过高致呼吸抑制
4. 局部麻醉剂推荐
药物名称
适用场景
浓度
给药途径与大小鼠剂量
麻醉时长
重点注意事项
利多卡因(Lidocaine)
大小鼠切口浸润、神经阻滞、大小鼠眼眶采血前麻醉
0.5%-2%
小鼠:局部浸润(最大剂量 17.5mg/kg);大鼠:局部浸润(按体重调整,避免超量)
2h
避免用于大小鼠循环不良、低血压个体
布比卡因(Bupivicaine)
大小鼠长效切口镇痛
0.25%-0.5%
小鼠:局部浸润(最大剂量 38mg/kg);大鼠:局部浸润(静脉注射 > 22.7mg/kg 致不良反应)
6h
麻醉效力是利多卡因 4 倍;起效稍慢,需提前给药
EMLA 乳膏(利多卡因 + 丙胺卡因)
大小鼠皮肤表面麻醉(如打耳标、剪尾)
1:1 混合
小鼠 / 大鼠:皮肤外敷(提前包扎,敷用时间根据镇痛需求调整)
1-2h
去除乳膏后镇痛仍持续 1h;避免用于破损皮肤
5.术后镇痛剂
疼痛等级
推荐药物
适用动物
剂量(mg/kg)
用药频率
重点注意事项
轻度
美洛昔康(Meloxicam)
全物种
1-2(小鼠 / 大鼠)
q24h
非甾体类,对胃肠道刺激小;可口服(PO)或皮下注射(SC)
轻度
卡洛芬(Carprofen)
犬、猫、啮齿类
5
q12-24h
避免用于肾功能不全动物
中度
丁丙诺啡(Buprenorphine)
全物种
0.05-0.1(小鼠)
q8-12h
镇痛远强于吗啡 ;注射剂不可口服
重度
吗啡(Morphine)
犬、猫、灵长类
2-5
q4h
管制药品;致犬呕吐、便秘
三、禁用麻醉剂专项说明
禁用药物
禁用核心原因
危害细节
水合氯醛
致癌性、强心血管抑制、组织刺激
1. 属于镇静剂,无镇痛效果;2.代谢产物三氯乙醇是强致癌物,长期接触致大小鼠肿瘤;3. 腹腔注射致大小鼠腹膜炎、肠梗阻;4. 麻醉剂量致大小鼠心跳骤停
乙醚
易燃易爆、呼吸道刺激、抢救困难
1. 空气浓度 > 1.8% 爆燃,大小鼠麻醉箱操作风险高;2. 致大小鼠呼吸道分泌物激增,易窒息;3. 过量后难排出,大小鼠死亡率高
氯仿
肝 / 肾 / 心脏毒性、不符合安乐死规范
1. 深度麻醉致大小鼠心肺衰竭;2. 低剂量致公鼠不育;3. 术后大小鼠肺炎高发
乌拉坦(Urethane)
强致癌性、组织毒性
1. 致大小鼠肠系膜毛细血管毒性、腹腔积液及肾损伤;2. 大鼠注射后血压骤降、血糖升高;3. 操作时对科研人员亦有致癌风险
四、大小鼠麻醉重点操作注意事项
1. 术前准备
- 禁食禁水:小鼠、大鼠无需禁食(不易呕吐),若特殊需求禁食,大鼠≤18h、小鼠≤16h(《实验动物麻醉技术.docx》);
- 急救药物:必备用阿托品(大小鼠心动过缓,0.02-0.1mg/kg SC)、肾上腺素(大小鼠心跳骤停,0.01mg/kg IV)、多巴胺(大小鼠呼吸抑制,5mg/kg IV)。
2. 麻醉监控(大小鼠关键指标)
监控指标
小鼠正常状态
大鼠正常状态
异常提示
应对措施
呼吸频率
80-120 次 / 分(胸式呼吸)
60-100 次 / 分(胸式呼吸)
腹式呼吸→过深;<50 次 / 分→抑制
减麻醉剂浓度;吸氧(异氟烷麻醉时调 O₂浓度至 50%)
黏膜颜色
口腔 / 肛门黏膜粉红色
口腔 / 牙龈黏膜粉红色
紫色→缺氧(发绀)
清理呼吸道;提高 O₂浓度至 100%
微血管再充血时间(CRT)
<2s
<2s
>2s→心输出量不足
补充生理盐水(小鼠 0.5-1ml IP,大鼠 1-2ml IP)
趾间反射
手术麻醉期减弱或消失
手术麻醉期减弱或消失
完全存在→过浅;完全消失→过深
过浅加 1/3 原剂量(如氯胺酮);过深停药 + 人工辅助呼吸
五、常见问题(FAQ)
1、哪些麻醉剂需要管制审批?
- 第二类精神药物:戊巴比妥钠(需向药品监督管理部门申请,购买流程复杂);
- 其他管制相关:氯胺酮(需提供明确购买渠道证明)。
2、如何避免麻醉剂导致的动物死亡?
- 选择安全范围广的药物(如异氟烷、舒泰 - 50);
- 严格控制剂量(参照物种特异性剂量,避免高剂量);
- 加强监护(如丙泊酚需监测呼吸,氯胺酮需观察反射);
- 现配现用不稳定药物(如阿佛丁)。
3、大小鼠使用舒泰 - 50 时,如何避免低剂量兴奋问题?
- 小鼠需严格控制剂量≥50mg/kg,推荐联合赛拉嗪 5mg/kg IP,抵消兴奋效应;
- 大鼠单独使用舒泰 - 50 时,从 40mg/kg IP 开始尝试,根据麻醉深度调整,避免超 75mg/kg(联合赛拉嗪时)。
4、戊巴比妥钠作为大小鼠安乐死药物时,需注意什么?
- 剂量严格控制在 100-200mg/kg IP,避免剂量不足致动物痛苦;
- 仅用非医用级粉剂时,需确保溶解完全(用无菌生理盐水稀释),避免污染致注射部位炎症。
5、存活手术与非存活手术麻醉有何区别?
- 存活手术(术后动物需存活):禁用三溴乙醇、乌拉坦;需严格无菌操作(术部剃毛消毒、器械灭菌);术后必须镇痛(如美洛昔康);同一动物不可重复 “开腹 / 开胸” 等 Major 手术。
- 非存活手术(术后安乐死):可例外使用三溴乙醇(需审批);无需无菌操作,但需戴手套 + 术部消毒。
6、胚胎移植实验优先选哪种麻醉剂?
- 优先选异氟烷(对胚胎无毒性,麻醉稳定,适合妊娠动物);次选三溴乙醇(仅限小鼠 / 大鼠,需现配现用,且仅非存活移植)。
7、麻醉中出现呼吸暂停怎么办?
- 立即停止给药,将动物头部抬高,清理呼吸道分泌物;
- 给予 100% 氧气吸入(面罩或气管插管);
- 若 30s 内无恢复,注射呼吸兴奋剂多巴胺(5mg/kg IV);
- 同时监测心率,若心率 < 正常 50%,注射阿托品(0.02mg/kg IV)。
七、参考文献
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